Moleküler tanı nedir, ne için ve nasıl yapılır

Moleküler tanı, örneğin genetik hastalıkların veya kanserin göstergesi olabilen DNA'daki değişiklikleri tanımlamayı amaçlayan bir dizi moleküler tekniğe karşılık gelir. Ek olarak, daha hızlı ve daha doğru bir teşhis yöntemini temsil ettiklerinden, bulaşıcı hastalıkların tanımlanması ve onaylanması için moleküler teknikler yaygın olarak kullanılmaktadır..

Moleküler tanı pahalıdır ve bu nedenle doktorlar tarafından çok sık talep edilmez, ancak değişikliğin varlığı, organizmanın işleyişine ve hastanın tepkisine müdahale etme şekli konusunda doğru sonuçlar verir. tedavi.

Ne için

Moleküler tanı, ana hedefler olan çeşitli hedeflerle yapılabilir:

• İle ilgili mutasyonların tanımlanması lösemi, Kronik Miyeloid Löseminin (CML) karakteristik özelliği olan BCR-ABL translokasyonunun tanımlanması;
• Karakteristik mutasyonları hematolojik hastalıklar, kalıtsal hemokromatoz, polisitemi vera, esansiyel trombositemi ve trombofili gibi.
• Oluşumunu gösteren moleküler değişiklikler kanser, örneğin kolorektal, akciğer, meme ve beyin kanseri;
• Teşhisi bulaşıcı hastalıklar, hepatit, üretrit, toksoplazmoz, leishmaniasis vb. HPV virüsü.

Moleküler tanı, diğer tanı tekniklerine kıyasla pahalı olarak kabul edilmesine rağmen, belirli bir hastalık ile ilgili değişikliği ve vücuttaki bu değişikliğin etki derecesini bildirebildiğinden, böylece kişinin tedavisine yardımcı olabildiği için daha doğrudur..

Çeşitli hastalıkların teşhisinde kullanılmasına ek olarak, özellikle kanserli kişilerde tedaviye yanıtı değerlendirmek için moleküler teknikler de kullanılır ve hastalık ilerlemesini ve nüksetmeyi gösteren en etkili yöntemlerden biridir..

Nasıl yapılır

Moleküler tanı, doktor tarafından hastanın durumu hakkında idrar, tükürük veya çoğu durumda kan olabilecek en iyi bilgi sağlayabilen herhangi bir örnekle yapılabilir. Sınav için oruç veya başka bir hazırlık gerekli değildir.

Örnek alınır ve muayeneyi veya yapılması gereken araştırmayı bildiren doktor rehberliği ile birlikte laboratuvara gönderilir. Gerçekleştirilen moleküler teknik, istenen muayeneye bağlıdır ve doktor tarafından talep edilen değişikliğin varlığını veya yokluğunu tanımlamayı amaçlayan bir dizi kesin prosedür içerir..

Genellikle gönderilen az miktarda örnek kullanılır, geri kalanı saklanır, böylece gerekirse sınav tekrarlanır.

Ana moleküler tekniklerin neler olduğunu görün

PCR

PCR, Polimeraz Zincir Reaksiyonu veya Polimeraz Zincir Reaksiyonu, mutasyonları tanımlamak ve böylece hastalıkların teşhisine yardımcı olmak için ister DNA ister RNA olsun genetik materyalin bir fragmanının amplifikasyonundan oluşan moleküler bir tekniktir..

Bu teknik, daha sonra bileşenlerden birinin, istenen muayeneye göre değişen ve işlevi malzemeyi fragmanlara ayırmak olan bir kısıtlama enzimi olduğu bir karışıma yerleştirilen genetik materyalin çıkarılması ve saflaştırılmasından yapılır. böylece olası genetik değişiklik tanımlanabilir. Karışım, muayeneye göre profesyonel tarafından belirtilen sıcaklık değişiminden hareket eden ve böylece genetik parçanın amplifikasyonuna izin veren bir cihaz olan bir termosikler içine yerleştirilir. Geleneksel PCR durumunda, amplifikasyondan sonra PCR ürünü elektroforez, bu, parçaların ağırlığına ve boyutuna dayanan moleküler bir tekniktir, yani bu özelliklere göre, analizi pozitif kontrol bandına, yani bilinen banda dayalı olarak yapılan bir bant deseni oluşturulur. genetik değişikliğe karşılık gelen.

Gerçek zamanlı PCR, qPCR olarak da adlandırılır, bu bir tür kantitatif PCR'dir, yani genetik değişikliğin tanımlanmasına ek olarak, gen ifadesi, yani değiştirilmiş genin organizmada ne kadar ifade edildiği hakkında bilgi verebilir ve böylece tanıya yardımcı olmak ve tedaviyi izlemek için kullanılır. Gerçek zamanlı PCR elektroforez gerektirmez, genetik materyali büyütme ve analiz etme sürecinin tamamı bir cihaz tarafından yapılır ve sonuç eğitimli bir sağlık uzmanı tarafından yorumlanır.

dizileme

dizileme "Molekül" terimi, genetik materyalin oluşturucu birimleri olan DNA nükleotitlerinin sekansının belirlenmesinden oluşan moleküler bir tekniktir. Sekanslama PCR'ye benzer bir reaksiyondan meydana gelir, ancak amplifikasyon karışımında, modifiye edilmiş nükleotitler, materyal amplifiye edildiğinde, modifiye edilmiş nükleotitler DNA'ya dahil edilir ve birkaç parça üretir; sekanslama ürününe karşılık gelir.

Reaksiyon ürünü, DNA sıralayıcı adı verilen bir cihaza yerleştirilir; buradaki parçalara, ekipmanın lazeri ile ulaşıldıkça, florokromlar, ekipman tarafından piklerle gösterilen her tepe noktası karşılık gelen flüoresans yayar. bir nükleotide. Reaksiyonun sonunda, ekipman DNA sekansını bilgilendirecek ve böylece doktora genetik hastalıkların teşhisinde yardımcı olabilecektir..