Elektroforez nedir, ne için ve nasıl yapılır

Elektroforez, moleküllerin boyutlarına ve elektrik yüklerine göre ayrılması amacıyla yapılan bir laboratuvar tekniğidir, böylece hastalıkların teşhisi yapılabilir, protein ekspresyonu doğrulanabilir veya mikroorganizmalar tanımlanabilir.

Elektroforez, laboratuvar rutininde ve araştırma projelerinde kullanılan basit ve düşük maliyetli bir prosedürdür. Elektroforezin amacına göre, bir tanıya ulaşmak için diğer testlerin ve muayenelerin yapılması gerekebilir, örneğin.

Ne için

Elektroforez, basit ve düşük maliyetli bir teknik olduğu için hem araştırma projelerinde hem de tanıda farklı amaçlar için yapılabilir. Böylece, elektroforez aşağıdakilere yapılabilir:

• Virüsler, mantarlar, bakteriler ve parazitleri tanımlayın, bu uygulama araştırma projelerinde daha yaygındır;
• Babalık testi;
• Proteinlerin ekspresyonunu kontrol edin;
• Mutasyonları tanımlayın, örneğin lösemi tanısında yararlı olun;
• Orak hücre anemisi tanısında faydalı olan dolaşımdaki hemoglobin tiplerini analiz eder;
• Kanda bulunan protein miktarını değerlendirin.

Elektroforezin amacına göre, doktorun teşhisi tamamlaması için diğer tamamlayıcı testlerin yapılması gerekebilir.

Nasıl yapılır

Elektroforez yapmak için, transillüminatör olarak da bilinen UV veya LED ışık ekipmanına ek olarak, amaca, elektroforez tamponuna ve kazanına, moleküler ağırlık markerine ve bir flüoresan boyaya ek olarak poliakrilamid veya agaroz olabilen jel gereklidir..

Jeli hazırladıktan sonra, kuyular jelde yaygın olarak tarak olarak adlandırılacak ve jelin yerleşmesine izin verecek şekilde belirli bir nesne yerleştirilmelidir. Jel hazır olduğunda, maddeleri kuyulara uygulayın. Bunun için, gözlerden birine bir moleküler ağırlık markörü, ne olduğu bilinen bir pozitif kontrol, reaksiyonun geçerliliğini garanti eden bir negatif kontrol ve analiz edilecek numuneler yerleştirilmelidir. Tüm numuneler bir floresan boya ile karıştırılmalıdır, çünkü bu şekilde transillüminatör üzerindeki bantları görselleştirmek mümkündür.

Örneklere sahip jel, spesifik tampon çözeltisini içeren elektroforez kabına yerleştirilmelidir ve daha sonra cihaz, elektrik akımı ve sonuç olarak ayırma için önemli olan potansiyel fark olacak şekilde açılır. parçacıklar yük ve boyutlarına göre. Elektroforetik çalışma süresi prosedürün amacına göre değişir ve 1 saate kadar sürebilir.

Belirlenen süreden sonra, transforüminatörden elektroforetik çalışmanın sonucunu görmek mümkündür. Jel UV veya LED ışığı altına yerleştirildiğinde, bant desenini görselleştirmek mümkündür: molekül büyüdükçe, göçü küçülür, kuyuya yaklaşır, molekül ne kadar hafif olursa, göç potansiyeli de o kadar büyük olur.

Reaksiyonun doğrulanması için, pozitif kontrolün bantlarının görselleştirilmesi ve negatif kontrolde hiçbir şeyin görselleştirilmemesi gerekir, aksi takdirde kontaminasyonun bir göstergesidir ve tüm işlem tekrarlanmalıdır..

Elektroforez türleri

Elektroforez farklı amaçlar için gerçekleştirilebilir ve amacına göre, en yaygın poliakrilamid ve agaroz olan çeşitli jel türleri kullanılabilir..

Mikroorganizmaları tanımlamak için elektroforez araştırma laboratuvarlarında yapılması daha yaygındır, ancak teşhis amaçlı olarak elektroforez, ana elektroforez türleri olan protein miktarındaki artışla birlikte gelişen hematolojik hastalıkları ve gelişen hastalıkları tanımlamak için kullanılabilir. :

1. Hemoglobin elektroforezi

Hemoglobin elektroforezi, kanda dolaşan farklı hemoglobin tiplerini tanımlamak için yapılan ve hemoglobin senteziyle ilişkili hastalıkların varlığını tanımlamayı mümkün kılan bir laboratuvar tekniğidir. Hemoglobin tipi, anormal hemoglobin varlığının tanımlanmasına izin veren, normal patern ile karşılaştırılabilen doğrulanmış bir bant paterni ile spesifik bir pH'ta, ideal olarak 8.0 ve 9.0 arasında elektroforez yoluyla tanımlanır..

Ne için yapılır: Hemoglobin elektroforezi, olasemi anemisi ve hemoglobin C hastalığı gibi hemoglobin senteziyle ilgili hastalıkları araştırmak ve teşhis etmek için ek olarak talasemiyi ayırmada faydalıdır. Hemoglobin elektroforezini nasıl yorumlayacağınızı öğrenin.

2. Protein elektroforezi

Protein elektroforezi, kanda dolaşan protein miktarını değerlendirmek ve böylece hastalıkları tanımlamak için doktor tarafından talep edilen bir muayenedir. Bu test plazmayı elde etmek için santrifüj edilen bir kan örneğinden yapılır, kanın diğer maddeler arasında proteinlerden oluşan kısmı.

Elektroforezden sonra, bir bant deseni görselleştirilebilir ve daha sonra teşhis için temel olan proteinlerin her bir fraksiyonunun miktarının belirtildiği bir grafik.

Ne için yapılır: Protein elektroforezi doktorun çoklu miyelom, dehidratasyon, siroz, inflamasyon, karaciğer hastalığı, pankreatit, lupus ve hipertansiyon oluşumunu bant modeline ve inceleme raporunda sunulan grafiğe göre incelemesine izin verir..

Nasıl yapıldığını ve protein elektroforezinin sonucunu nasıl anlayacağınızı anlayın.